labbioreagents REK-01-1215說明書

利妥昔單抗 （美羅華®）（人）ELISA試劑盒

Rituximab (Mabthera)

(Human) ELISA Kit

目錄號：REK-01-1215規格：1板（96孔）

版本：02

僅供研究使用

一般描述

利妥昔單抗ELISA試劑盒是一種夾心酶聯免疫分析法，用于定量測定血清和血漿中的利妥昔單抗，具有較高的靈敏度和特異性。

試劑盒性能

· 靈敏度：10 ng/mL

· 分析范圍：10-250 ng/mL

· 交叉反應：與天然血清免疫球蛋白無交叉反應

· 回收率：已知濃度的正常人血清樣品為80-120%。

· 精密度

（CV(%)= SD/平均值×100）

Ø 批內：CV < 20%

Ø 批間：CV < 20%

提供的材料

組件列表

儲存說明

從運輸之日起，整個試劑盒可在4 ℃下儲存長達12個月。

試驗方案

分析前，使所有試劑、微孔板和樣品恢復至室溫。

1. 使用平板包被緩沖液將捕獲抗體（未結合的抗利妥昔單抗抗體）稀釋10倍。用50µL/孔制備的捕獲抗體包被96孔板，并在4 ℃下孵育過夜，同時振搖。

2. 用0.05%PBST洗板5次（5次）。

3. 向各孔中加入100µL封閉緩沖液，封閉平板，并在室溫下孵育1小時。

4. 用0.05%PBST洗板5次（5次）。

• 用試驗稀釋劑稀釋利妥昔單抗預加標血清或血漿，制備標準品(10–250 ng/mL)。向適當孔中加入50µL標準品、對照品和稀釋樣品。蓋上微孔板，在室溫下孵育1小時。

6. 用0.05%PBST洗板5次（5次）。

• 用試驗稀釋劑將檢測抗體（生物素偶聯抗利妥昔單抗檢測抗體）稀釋10倍。向各孔中加入50µL制備的檢測抗體溶液，并在室溫下孵育1小時。

8. 用0.05%PBST洗板5次（5次）。

9. 加入100µL鏈霉親和素(HRP)，并在室溫下于暗處孵育平板30 min。

10. 用0.05%PBST洗板5次（5次）。

11. 加入100µL TMB底物溶液，并將平板在室溫下避光孵育20 min。

12. 加入100µL終止液終止反應。

13. 在20 min內，在酶標儀中讀取設定為450 nm的吸光度（參考波長為650 nm）。

技術提示

· 使用前將試劑恢復至室溫

· 不同批次的試劑在使用時不得混合。

· 避免樣本和試劑之間的任何污染。

· TMB保持無色直至加入平板。TMB避光保存。

• 加入終止液后，孔中的顯色顏色將立即從藍色變為黃色。顯示綠色的孔表示終止液和TMB未充分混合。
• 繪制各標準品的OD450/650 nm作為Y軸，對應利妥昔單抗濃度作為X軸，構建四參數邏輯(4 pL)標準曲線。在OD450/650 nm與利妥昔單抗濃度不能很好匹配的情況下，請使用五參數邏輯(5 pL)或具有適當加權因子的點對點生成標準曲線。

安全要求

· 處理試劑和樣本時，穿戴適當的PPE（例如手套、實驗室工作服）。

• 本試劑盒含有人源性組分。發現這些材料對HBsAg、HCV抗體以及HIV 1/2抗原和抗體無反應性。然而，這些材料應被視為具有潛在傳染性，因為沒有試驗可以保證*沒有傳染性因子。
• 避免直接接觸TMB和終止液，這可能會引起皮膚/眼睛刺激。如果與終止液和底物溶液接觸，請用水*清洗皮膚/眼睛，并在必要時就醫。

· 根據適用的國家法規要求處置消耗材料和未使用的內容物。

平板布局